Sebagaimana dijelaskan sebelumnya, film ini diangkat dari urban legend yang sempat viral pada 2016 silam. Kisah tersebut pada intinya menuturkan tentang pengisi mata kuliah yang diketahui adalah makhluk gaib setelah seorang mahasiswa melihat kakinya tak menapak tanah. Dalam film Dosen Gaib: Sudah Malam atau Sudah Tahu, sosok pengisi mata kuliah itu bernama Pak Basuki.
Ia dikenal sebagai dosen galak yang sering memberi mahasiswa nilai jelek tanpa alasan yang berdasar. Hal tersebut dialami oleh Amelia, Emir, Maya, dan Fattar. Keempat mahasiswa ini dinyatakan gagal dalam mata kuliah Pak Bakti dan diperintahkan untuk mengikuti semester pendek, yang dilangsungkan di kampus saat musim libur.